試題詳解

19. 你正在研究一個疑似受 miRNA 調控的人類基因 GENE-X，該 miRNA 預測會結合 GENEX 的 3′非轉譯區(3′UTR)。為驗證此 miRNA 是否真的調控此基因，你計畫進行雙冷光報導基因實驗(dual-luciferase assay)。你構築了一個質體，將 GENE-X 的 3′UTR 接到冷光素酶基因的 3′端。你接著將此質體與該 miRNA 一同轉染進 293T 細胞。以下哪一組實驗設計能最佳確認該 miRNA 是否透過 3′UTR 調控 GENE-X 表現？
(A) 在不含任何 miRNA 的條件下觀察冷光素酶表現是否上升
(B) 測量該 miRNA 的 mRNA 序列與 GENE-X mRNA 是否一致
(C) 將 GENE-X 的啟動子與 GFP 結合，觀察是否受 miRNA 調控
(D) 使用 siRNA 直接降解 GENE-X 的 mRNA，觀察冷光素酶變化
(E) 加入對照組：轉染突變過的 3′UTR(缺乏 miRNA 結合位)與 miRNA，並比較冷光素酶表現