四、根據由內部標準法（internal standard method）所衍生的分析方法，以高效 能液相層析術（HPLC）測量環孢素（cyclosporin A，為預防皮膚與器官移 植排斥的免疫抑制劑），所採用的步驟詳述如後。
樣品的製備：抽取1毫升（mL）的血漿，其內再添加2毫升的水與乙腈 （acetonitrile, CH3CN）的混合物（80/20比例），並內含有250奈克（ng, nanogram; 1 ng = 1 ✖ 10-9 g）cyclosporin D為內部標準品。（cyclosporin D與 cyclosporin A有相似的結構）
這3毫升的新混合物，使其通過一個用完即可丟棄的固相萃取分離管柱 （solid phase extraction column），以分離留存在吸附劑上的cyclosporins。 在分離管柱經過洗滌與乾燥程序後，cyclosporins再以1.5毫升的乙腈洗離， 將溶劑蒸發，使其濃縮為200微升（μL）。一部分的這個最後溶液，再注射 至層析儀中。
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