申論題 - 阿摩線上測驗

申論題資訊

試卷：109年 - 109 高等考試_三級_環境檢驗、化學工程：儀器分析#88691
科目：儀器分析
年份：109年
排序：0

題組內容

四、根據由內部標準法（internal standard method）所衍生的分析方法，以高效能液相層析術（HPLC）測量環孢素（cyclosporin A，為預防皮膚與器官移植排斥的免疫抑制劑），所採用的步驟詳述如後。

樣品的製備：抽取1毫升（mL）的血漿，其內再添加2毫升的水與乙腈（acetonitrile, CH₃CN）的混合物（80/20比例），並內含有250奈克（ng, nanogram; 1 ng = 1 ✖ 10^-9 g）cyclosporin D為內部標準品。（cyclosporin D與 cyclosporin A有相似的結構）

這3毫升的新混合物，使其通過一個用完即可丟棄的固相萃取分離管柱（solid phase extraction column），以分離留存在吸附劑上的cyclosporins。在分離管柱經過洗滌與乾燥程序後，cyclosporins再以1.5毫升的乙腈洗離，將溶劑蒸發，使其濃縮為200微升（μL）。一部分的這個最後溶液，再注射至層析儀中。

申論題內容

(二)在固相的萃取步驟完成後，可否推斷出cyclosporins的回收率？試述其理由。

樣品：標準品係以不含cyclosporin的原始血漿製備之。擬製備的6個不同的溶液，其內各自添加所需用量的cyclosporin A，以分別產生 50 ng/mL、100 ng/mL、200 ng/mL、400 ng/mL、800 ng/mL及1000 ng/mL 的濃度。從每一個溶液中抽取1毫升，再添加250奈克（ng）cyclosporin D為內標準品至每一個溶液，然後比照與上述相同的萃取系列流程。所測得之6個標準品校正數據（C vs. R_h），詳如下表。

分離管柱（Column）規格：Supelco 75 ✖4.6 mm、Silica gel（矽膠）3 μm、 phase（固定相）RP-8。