第二大題 (5 分)
DNA 定序:雙去氧核糖核苷酸鏈終止法
在實驗室進行 DNA 複製過程,應有的原料如:引子、DNA 聚合酶、核苷酸單體等。DNA 定序雙去氧鏈終止
法,除上述原料外再加入足量的雙去氧核苷酸(ddATP、 ddTTP 、ddCTP、 ddGTP)。雙去氧核苷酸可在 DNA 聚合
酶的催化下,與核酸片段結合,但結合了雙去氧核苷酸的核酸片段,就不能再進行聚合反應,而終止了該核酸片段的
長度。因此,在大量、隨機的 DNA 複製過程中,就會產生各種不同的長度的核酸片段。 不同的核酸片段長度,可用凝膠電泳進行分離,核酸片段長度越短者,在凝膠中移動的距離越遠;越長者移動距
離越短。
現以引子:5’TTGT3’,附著上模版股:5’ ATCTGACTTCGACAA3’,進行雙去氧鏈終止法。進行該方法時,共分
為 A、T、C、G 四組。四組均有加入:引子、模板、DNA 聚合酶、四種核苷酸單體等複製反應所需材料。A 組則再
加入 ddATP、T 組則再加入 ddTTP、C 組則再加入 ddCTP、G 組則再加入 ddGTP。反應完成後進行凝膠電泳分析。電
泳分析時,共有五個電泳槽孔。電泳槽孔的最左邊為標準試液,試液內含 11 種片段長度的核酸,分別為 5~15 個核苷
酸)。電泳槽孔內含物由左至右分別為:標準試液、A 組產物、T 組產物、C 組產物、G 組產物。
試繪出電泳後凝膠上顯示的條帶分佈圖形
下為圖式說明:1. 標準試液所呈現的條帶分佈、電泳槽孔的位置、組別
2. 每個槽孔的核酸片段自槽孔由上至下移動
3. 反應後最短片段長度位,由c組的電泳槽孔所產生
請依上述題示與指示,於答案巻(如下圖)中繪出其他電泳槽孔條帶的位置(5 分,錯 1 格扣 1 分,扣完 5 分為止)
