題組內容
第四題:
重組 DNA 技術(recombinant DNA technology)又稱為遺傳工程(genetic engineering),
主要藉由操作 DNA 的重組,將目標 DNA 片段選殖(cloning)於適當的載體(vector)上,並導
入宿主細胞中以獲得外源蛋白質。請回答下列問題:
(一)大多數的載體衍生自細菌的質體(plasmid),用於 DNA 選殖的載體需具備三個要 件,除了具有複製起始點(replication origin)以外,其他二個要件為何?其功能為 何?【6 分】
詳解 (共 1 筆)
詳解
①含有多個限制酶切點。每種酶的切點最好只有一個,如大腸桿菌pBR322就有多種限制酶的單一識別位點,可適於多種限制酶切割的DNA插入 ②有一定的標記基因,便於進行篩選。如大腸桿菌的pBR322質粒攜帶氨苄青黴素抗性基因和四環素抗性基因,就可以作為篩選的標記基因。
一般來說,天然載體往往不能滿足上述要求,因此需要根據不同的目的和需要,對載體進行人工改建。現在所使用的質粒載體幾乎都是經過改建的。