題組內容
第四題:
重組 DNA 技術(recombinant DNA technology)又稱為遺傳工程(genetic engineering),
主要藉由操作 DNA 的重組,將目標 DNA 片段選殖(cloning)於適當的載體(vector)上,並導
入宿主細胞中以獲得外源蛋白質。請回答下列問題:
(二)將外源 DNA(或稱為 insert)接入載體的過程稱之為選殖(cloning),常會需要用 到許多酵素,請簡述下列酵素於選殖過程中的使用目的:(1) DNA polymerase; (2) restriction endonuclease;(3) DNA ligase。【9 分】
詳解 (共 1 筆)
詳解
(1) DNA polymerase: 是一項利用DNA雙鏈複製的原理,在生物體外複製特定DNA片段的核酸合成技術。透過這項技術,可在短時間內大量擴增目的基因,而不必依賴大腸桿菌或酵母菌等生物體。
(2) restriction endonuclease: 是一種能將雙股DNA切開的酶。它的切割方法是將醣類分子與磷酸之間的鍵結切斷,進而於兩條DNA鏈上各產生一個切口,且不破壞核苷酸與鹼基。
(3) DNA ligase: 在分子生物學中扮演一個既特殊又關鍵的角色,那就是把兩條DNA黏合成一條。無論是雙股或是單股DNA的黏合,DNA連接酶都可以藉由形成磷酸雙脂鍵將DNA在3'端的尾端與5'端的前端連在一起。